初始操作條件的確定

確定初始操作條件；氣相色譜儀色譜柱形式的選擇；分離條件優(yōu)化；程序升溫。

1、氣相色譜儀確定初始操作條件

進(jìn)樣量要根據(jù)樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/ml時(shí)填充柱的進(jìn)樣量通常為1——5μL，而對于毛細(xì)管柱，若分流比為50：1時(shí)，進(jìn)樣量一般不超過2μL。如果這樣的進(jìn)樣量不能滿足檢測靈敏度的要求，可考慮加大進(jìn)樣量，但以不超載為限。進(jìn)樣口溫度主要由樣品的沸點(diǎn)范圍決定，還要考慮色譜柱的使用溫度。即首先要保證待測樣品全部氣化，其次要保證氣化的樣品組分能夠全部流出色譜柱，而不會(huì)在柱中冷凝。原則上講，進(jìn)樣口溫度高一些有利，一般要接近樣品中沸點(diǎn)zui高的組分的沸點(diǎn)，但要低于易分解組分的分解溫度，常用的條件是250——350℃。實(shí)際操作中，進(jìn)樣口溫度可在一定范圍內(nèi)設(shè)定，只要保證樣品*汽化即可，而不必進(jìn)行很的優(yōu)化。注意，當(dāng)樣品中某些組分會(huì)在高溫下分解時(shí)，就應(yīng)適當(dāng)降低汽化溫度。必要時(shí)可采用冷柱上進(jìn)樣或程序升溫汽化（PTV）進(jìn)樣技術(shù)。

氣相色譜儀色譜柱溫度的確定主要由樣品的復(fù)雜程度和汽化溫度決定。原則是既要保證待測物的*分離，又要保證所有組分能流出色譜柱，且分析時(shí)間越短越好。組成簡單的樣品用恒溫分析，這樣分析周期會(huì)短一些。特別是用填充柱時(shí)，恒溫分析時(shí)色譜圖的基線要經(jīng)程序升溫時(shí)穩(wěn)定得多。對于組成復(fù)雜的樣品，常需要用程序升溫分離，因?yàn)樵诤銣貤l件下，如果柱溫較低，則低沸點(diǎn)組分分離得好，而高沸點(diǎn)組分的流出時(shí)間會(huì)太長，造成峰展寬，甚至滯留在色譜柱中造成柱污染；反之，當(dāng)柱溫太高時(shí)，低沸點(diǎn)組分又難以分離。

毛細(xì)管柱的一個(gè)zui大優(yōu)點(diǎn)就是可在較寬的溫度范圍內(nèi)操作，這樣既保證了待測組分的良好分離，又能實(shí)現(xiàn)盡可能短的分析時(shí)間。一般來講，色譜柱的初始溫度應(yīng)接近樣品中zui輕組分的沸點(diǎn)，而zui終溫度則取決于zui重組分的沸點(diǎn)。升溫速率則要依樣品的復(fù)雜程度而定。建議毛細(xì)管柱的嘗試溫度條件設(shè)置為：

OV-1（SE-30）或SE-54柱：從50℃到280℃，升溫速率10℃/min；

OV-17（OV-1701）柱：從60℃到260℃，升溫速率8℃/min；

PEG-20M柱：從60℃到200℃，升溫速率8℃/min。

氣相色譜儀檢測器的溫度是指檢測器加熱塊溫度，檢測器溫度的設(shè)置原則是保證流出色譜柱的組分不會(huì)冷凝同時(shí)滿足檢測器靈敏度的要求。大部分檢測器的靈敏度受溫度影響不大，故檢測器溫度可參照色譜柱的zui高溫度設(shè)定，而不必優(yōu)化。

載氣流速的確定相對容易一些，開始可按照比*流速（氮?dú)饧s為20cm/s，氦氣約為25cm/s，氫氣約為30cm/s）高10%來設(shè)定。然后再根據(jù)分離情況進(jìn)行調(diào)節(jié)。原則是既保證待測物的*分離，又要保證盡可能短的分析時(shí)間。用填充柱時(shí)，載氣流速一般設(shè)為30ml/min?？諝?，300——400ml/min；氫氣30——40ml/min；氮?dú)猓ㄎ泊禋猓?0——40ml/min。

2，氣相色譜儀色譜柱形式的選擇

當(dāng)欲測組分之間的相互分離系數(shù)很小時(shí)，即使對各種操作條件加以探討，為使它們*分離仍必須采用理論塔板數(shù)（N）大的色譜柱。理論塔板數(shù)N按一般填充柱≤微填充柱≤填充毛細(xì)管柱≤空心毛細(xì)管柱的順序增加。由于N不同，有時(shí)色譜圖也不相同。

3，氣相色譜儀分離條件優(yōu)化

事實(shí)上，當(dāng)樣品和儀器配置確定之后，一個(gè)色譜技術(shù)人員zui經(jīng)常的工作除了更換色譜柱外，就是改變色譜柱溫和載氣流速，以期達(dá)到*化的分離。柱溫對分離結(jié)果的影響要比載氣的影響大。簡單地說，分離條件的優(yōu)化目的就是要在zui短的分析時(shí)間內(nèi)達(dá)到符合要求的分離結(jié)果。